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1. 從液氮或-80℃冰箱中取出凍存細(xì)胞，馬上放入37℃水浴鍋中，并不時(shí)地?cái)嚢?，使?xì)胞在2min內(nèi)快速解凍。

2. 待其融化之后，用75%酒精擦拭冷凍管外部，在超凈臺中打開凍存管蓋子，吸取細(xì)胞懸液加入至含有完全培養(yǎng)基的離心管中，低速離心5min后棄去上清液，再加入適量完全培養(yǎng)基輕輕吹打，使細(xì)胞重懸。

3. 將重懸后的細(xì)胞緩慢加入到含有培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶，十字輕晃細(xì)胞培養(yǎng)瓶令細(xì)胞分布均勻，然后放入恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

1. 整個(gè)過程應(yīng)在超凈臺中進(jìn)行，注意嚴(yán)格使用無菌操作技術(shù)。

2. 解凍過程務(wù)必快速，如果復(fù)溫速度太慢，會(huì)造成細(xì)胞損傷。

3. 凍存管放入水浴中注意用鑷子夾住細(xì)胞凍存管并在水浴中不時(shí)晃動(dòng)，使其受熱均勻，并防止水浴時(shí)水進(jìn)入細(xì)胞凍存管內(nèi)造成污染。

4.打開細(xì)胞凍存管之前要用酒精棉球?qū)龃婀芟静⒘栏伞?/p>

5.液氮操作有一定的危險(xiǎn)性，打開液氮罐取出細(xì)胞凍存管時(shí)，戴上防護(hù)眼鏡。